Пцр анализ в гинекологии: показания, правила подготовки, забора материала и проведения

В настоящее время мазок на ИППП является базовым и самым простым способом диагностирования большого количества заболеваний, передающихся половым путем. После забора биологический материал отправляется в лабораторию, где его исследуют с помощью микроскопа или же методом ПЦР.

Последний считается наиболее точным и информативным, но анализ в этом случае выполняется немного дольше. Для того, чтобы результаты мазка на ИППП были максимально достоверными, необходимо правильно подготовиться к забору биоматериала. Расшифровкой заключения занимается гинеколог или уролог.

Эти же врачи и составляют схему лечения при выявлении той или иной патологии.

Что позволяет обнаружить

Инфекции, передающиеся половым путем — это очень широкий спектр заболеваний. Мазок на ИППП позволяет выявить большинство из них:

  • Хламидиоз.
  • Сифилис.
  • Гонорею.
  • ВИЧ.
  • Вирус папилломы человека.
  • Микоплазмоз.
  • Цитомегаловирус.
  • Уреаплазмоз.
  • Лимфогранулематоз.
  • Шанкроид.
  • Урогенитальный шигеллез.
  • Трихомониаз.
  • Герпес.
  • Гарднереллез.

Это список заболеваний, которые диагностируются у пациентов чаще всего. Важно знать о том, что мазок на ИППП позволяет обнаружить любые инфекции, находящиеся в секрете, который вырабатывается уретрой (у мужчин) и влагалищем (у женщин). Наиболее сложно диагностируются вирусы. Это обусловлено тем, что они настолько малы, что их очень трудно увидеть даже под микроскопом.

ПЦР анализ в гинекологии: показания, правила подготовки, забора материала и проведения

Показания

И у мужчин, и у женщин мазок на ИППП — это стандартная процедура, включенная в список ежегодных профилактических осмотров. Исследование назначается в обязательном порядке работникам, профессиональная деятельность которых связана с пищевой промышленностью.

С профилактической целью рекомендуется сдавать биоматериал не реже, чем 1 раз в год. Это актуально даже в том случае, если человека не беспокоят никакие тревожные симптомы.

В обязательном порядке нужно посетить врача и сдать мазок при появлении следующих признаков инфекций, передающихся половым путем:

  • Повышенная степень утомляемости.
  • Выделения из уретры, отличные от нормальных. Как правило, они имеют слизистый или гнойный характер.
  • Мутная моча.
  • Выраженный зуд и жжение в зоне гениталий.
  • Увеличенные лимфатические узлы в области паха.
  • Болезненные ощущения во время акта мочеиспускания.
  • Повышение температуры тела до субфебрильных значений.
  • Дискомфортные ощущения во время половых контактов.
  • Боль в нижней части живота.
  • Гнойники и язвы, образованные на наружных половых органах.

Это клинические проявления ИППП, характерные для лиц обоих полов. У женщин дополнительно могут возникать следующие симптомы: нарушение менструального цикла, раздражение в области заднепроходного отверстия, непривычные выделения из ануса, сыпь на половых губах, отек вульвы.

Специфические признаки ИППП у мужчин: наличие примесей крови в семенной жидкости, частые позывы к мочеиспусканию, проблемы с эякуляцией, болезненные ощущения в мошонке, сыпь на половом члене.

Кроме того, у женщин мазок на ИППП берется как при планировании беременности, так и во время периода гестации. Также обратиться к врачу рекомендуется как можно скорее после того, как был совершен сексуальный контакт без использования барьерных защитных средств.

ПЦР анализ в гинекологии: показания, правила подготовки, забора материала и проведения

Подготовка

Чтобы результаты исследования были максимально достоверными, необходимо строго следовать всем рекомендациям врача.

Правила подготовки к забору биоматериала:

  • Примерно за 2 недели нужно отказаться от приема любых антибактериальных средств. Если это невозможно по жизненным показаниям, важно поставить об этом в известность лечащего врача. Как правило, в подобных случаях исследование переносится на другой день. Это обусловлено тем, что антибиотики могут стереть следы активности возбудителя венерического заболевания. В некоторых случаях врачи просят отказаться от приема препаратов хотя бы на 24 часа. За этот период организму пациента не будет нанесен вред, а результаты будут более достоверными.
  • Осуществлять гигиенические мероприятия рекомендуется с помощью обычного мыла. Использовать антибактериальные средства накануне забора биоматериала недопустимо.
  • Примерно за 3 часа до исследования не рекомендуется опорожнять мочевой пузырь.
  • За двое суток необходимо отказаться от любых сексуальных контактов.
  • Женщинам сдавать мазок рекомендуется сразу после завершения менструального кровотечения.

В некоторых случаях врачи советуют накануне внести корректировки в рацион питания. Данный метод называется провокация. Пациенту рекомендуется накануне питаться жирной, жареной, копченой, соленой пищей. Употребление таких блюд несколько ослабляет защитные силы организма, благодаря чему патогены максимально себя проявляют.

Алгоритм забора биоматериала у женщин

Взятие мазка на ИППП осуществляется в процессе приема у врача-гинеколога. Непосредственно перед забором биоматериала специалист опрашивает пациентку. Врачу необходимо предоставить всю информацию относительно имеющихся симптомов и их интенсивности (при их наличии). После этого специалист приступает к физикальному осмотру и непосредственно к взятию мазка.

Алгоритм забора биоматериала:

  • Пациентка освобождает от одежды нижнюю часть тела.
  • Женщина размещается на гинекологическом кресле.
  • Врач надевает одноразовые стерильные перчатки и осматривает наружные половые органы женщины.
  • Специалист вводит во влагалище пациентки специальный расширитель. Затем он осматривает с помощью зеркала слизистые оболочки.
  • Врач берет инструмент для забора биоматериала (внешне он напоминает обыкновенную ватную палочку) и вводит его поочередно в шейку матки, влагалище и мочеиспускательный канал. После этого медицинское изделие вместе с полученным секретом закрывается в пробирке и отправляется в лабораторию на исследование.

Процедура забора биоматериала не сопряжена с возникновением болезненных ощущений. Пациентка может испытывать лишь некоторый дискомфорт из-за разницы температур тела и используемых гинекологических инструментов. Исключением являются случаи, когда в области половых органов протекает выраженное воспаление.

ПЦР анализ в гинекологии: показания, правила подготовки, забора материала и проведения

Процесс забора биоматериала у мужчин

Алгоритм взятия секрета осуществляется на приеме у уролога. Специалист также первоначально опрашивает пациента, интересуясь, беспокоят ли его какие-либо тревожные симптомы.

Алгоритм взятия мазка на ИППП у мужчин:

  • Врач просит освободить от одежды половые органы.
  • Специалист надевает одноразовые перчатки и осматривает кожный покров и слизистые оболочки на предмет выявления высыпаний и гнойных очагов.
  • Врач берет специальный зонд. Берется мазок на ИППП из уретры. Врач вводит зонд на 3-4 см и медленно его прокручивает.
  • После этого специалист извлекает медицинское изделие и делает мазок на предметном стекле. Последнее затем отправляется в лабораторию.

Согласно многочисленным отзывам, забор биоматериала сопровождается не столько болезненными ощущениями, сколько психологическим дискомфортом. Однако при регулярном посещении врача он очень быстро исчезает.

ПЦР анализ в гинекологии: показания, правила подготовки, забора материала и проведения

Способы диагностики

Самым простым методом исследования мазка является микроскопия. Она позволяет получить результаты в сжатые сроки. Метод подразумевает исследование биоматериала под микроскопом.

В настоящее время все чаще проводится ПЦР мазка на ИППП. Суть полимеразной цепной реакции состоит в следующем. В лаборатории специалист отбирает из биоматериала те участки, которые содержат ДНК возбудителя того или иного недуга. Затем клетки многократно увеличиваются, благодаря чему распознать провоцирующего агента становится довольно легко.

Исследование мазка на ИППП методом ПЦР проводится чаще всего. Это обусловлено тем, что данный анализ на сегодняшний день считается самым достоверным. Для подтверждения диагноза может быть дополнительно назначен бакпосев.

  Фригидность у женщин причины и симптомы лечениеПЦР анализ в гинекологии: показания, правила подготовки, забора материала и проведения

Показатели нормы для женщин

После проведения исследования в лаборатории оформляют заключение. В нем отражены показатели нормы и фактические значения.

Расшифровкой мазка на ИППП у женщин должен заниматься гинеколог. Однако и сама пациентка в силах сравнить полученные показатели с теми, которые должны быть.

  • Лейкоциты — от 0 до 10 ед.
  • Эпителий — 5-20 ед.
  • Слизь — небольшое количество.
  • Трихомонады, гонококки, хламидии, дрожжи и прочие патогенные микроорганизмы — отсутствуют.
  • Другая микрофлора — палочковая.
  • Степень чистоты — 1-2.

Таким образом, в норме патогенных микроорганизмов в биологическом материале быть не должно.

ПЦР анализ в гинекологии: показания, правила подготовки, забора материала и проведения

Показатели нормы для мужчин

В этом случае расшифровка мазка на ИППП представляет больше сложностей, в связи с чем доверить это рекомендуется специалисту.

Нормальными считаются следующие значения:

  • Лейкоциты — от 0 до 5 в поле зрения. Если они повышены, рекомендуется повторно сдать мазок из уретры на ИППП методом ПЦР (только если изначально биоматериал изучался под микроскопом).
  • Эпителий. В норме он должен быть плоским, допускается наличие цилиндрического. Количество клеток эпителия в поле зрения должно составлять от 5 до 10. При повышении данного показателя принято говорить о воспалительном процессе. Наличие клеток переходного эпителия свидетельствует о простатите.
  • Слизь — умеренное количество. Иногда в заключении можно увидеть значение «++» или «+++». В этом случае также принято говорить о развитии воспалительного процесса.
  • Гонококки, трихомонады, дрожжи, грибы, хламидии, уреаплазмы и прочие патогенные микроорганизмы — не обнаружены.

Кроме того, микрофлора в норме должна быть представлена единичными кокками.

Сколько ждать

Сроки исполнения напрямую зависят от того, с помощью какого метода изучается биологический материал. Самым простым способом является микроскопия. Как правило, в лаборатории мазок изучается данным методом довольно быстро. Чаще всего анализ занимает не более часа.

Быстрее всего результаты исследования получают пациенты, обратившиеся в медицинское учреждение, оснащенное собственной лабораторией. В противном случае необходимо учитывать время, потраченное на доставку биоматериала.

Как правило, получить результаты исследования можно уже на следующий день.

Анализ мазка методом ПЦР — не только надежный, но и быстрый метод диагностики заболеваний, передающихся половым путем. В среднем, время его проведения составляет 4 часа. Таким образом, получить результаты исследования возможно в день сдачи или же на следующие сутки.

Читайте также:  Азооспермия: виды и причины патологии, диагностика и лечение, вероятность выздоровления

Бактериологический посев — это метод, для проведения которого нужно не менее 1-й недели. Его суть состоит в том, чтобы поместить биоматериал в благоприятную среду и следить за жизнедеятельностью возбудителей при их наличии. Именно поэтому исследование требует много времени.

ПЦР анализ в гинекологии: показания, правила подготовки, забора материала и проведения

Отклонения от нормы: что делать

При выявлении патогенов необходимо как можно скорее начать лечение. Если было проведено микроскопическое исследование, врач может порекомендовать сдать мазок на ИППП повторно, но в этом случае биоматериал будет исследован методом ПЦР. Реже назначается бактериологический посев.

При подтверждении диагноза врач составляет максимально действенную схему лечения. Она может включать прием медикаментов (антибиотиков), местную обработку наружных половых органов, а также спринцевания. Выбор препаратов осуществляется исключительно врачом. Специалист должен учитывать не только вид возбудителя, но и индивидуальные особенности здоровья пациента.

Где сдать

Забор биоматериала на ИППП осуществляется как в частных, так и государственных медицинских учреждениях. В поликлиниках по месту жительства пройти исследование можно бесплатно. Это актуально для микроскопического метода. Проведение ПЦР и бакпосева требует наличия определенных реактивов, благодаря чему данные исследования являются платными даже в бюджетных учреждениях.

Стоимость

Средняя цена микроскопического анализа — 450 рублей. За исследование методом ПЦР придется заплатить около 2200 рублей. При этом анализ проводится на 12 самых распространенных инфекций. Расширенное исследование, соответственно, дороже. Стоимость бакпосева составляет примерно 1500 рублей.

В заключение

Каждый человек должен ежегодно сдавать мазок на инфекции, передающиеся половым путем, или чаще, если периодически появляются тревожные симптомы. В лаборатории биоматериал может быть изучен несколькими способами. Одним из самых информативных является метод ПЦР.

ПЦР анализ в гинекологии: показания, правила подготовки, забора материала и проведения

ПЦР на ИППП – это специальный метод исследования различных биологических жидкостей на предмет наличия в организме венерических заболеваний. Изобретение такой диагностики позволило выявлять скрытые формы ЗППП в самой начальной стадии.

  • Что такое ПЦР на ИППП
  • Показания к назначению ПЦР на ЗППП
  • Преимущества и недостатки метода
  • Какие заболевания можно выявить с помощью ПЦР?
  • Виды анализов на ЗППП
  • Соскоб из уретры и цервикального канала
  • Сперма и секрет простаты
  • Подготовка к сдаче анализа
  • Сроки исполнения анализов на ЗППП
  • Сколько стоит ПЦР на ИППП?

Источник: https://gemoglobin.top/podgotovka-k-analizu-na-ippp-metodom-pcr/

Пцр у женщин

ПЦР анализ в гинекологии: показания, правила подготовки, забора материала и проведения

ПЦР – полимеразная цепная реакция. Это генетический тест. Позволяет в собранном у пациента материале обнаружить ДНК(РНК) или части ДНК(РНК) инфекционного агента или дезоксирибонуклеазу (рибонуклеазу) самого пациента.

Амплификация – копирование коротких фрагментов ДНК микроорганизма. Осуществляется несколько раз в пределах одного температурного цикла в условиях специализированной лаборатории.

Свойства метода ПЦР:

  • высокая точность и чувствительность метода
  • специфичность (выделяют ДНК инфекционного агента, ДНК пациента и других микроорганизмов)
  • универсальность выполнения лабораторного этапа исследования
  • скорость выполнения ПЦР выше, чем при использовании столь же точного культурального метода (от 5 часов до суток)

ПЦР является достаточно точным анализом, используемым при постановке диагноза при любом инфекционном заболевании.

Когда результат трактуется как ложноотрицательный?

Если в крови, моче, мокроте или мазках нет следов возбудителя, так как микроорганизмов в принципе мало, или материал забран с нарушением требований к технике манипуляции. Ложноположительных результатов при выполнении полимеразной цепной реакции не бывает.

ПЦР не зависит от пола пациента, сдававшего данный материал.  Соответственно, по сути, Пцр у женщин ничем не отличается от ПЦР у мужчин.

ПЦР анализ в гинекологии: показания, правила подготовки, забора материала и проведения

Что нужно сдавать на ПЦР

Мазки:

  • из мочеиспускательного канала
  • из прямой кишки
  • со слизистой глаза и нижнего века
  • из цервикального канала
  • из влагалища
  • из зева
  • с поверхности кожных высыпаний и язв

Кровь, секрет предстательной железы, вода, почва, смывы с поверхностей и даже продукты.ПЦР анализ в гинекологии: показания, правила подготовки, забора материала и проведения

Применение ПЦР

  • диагностика заразных заболеваний, в том числе венерических
  • определение генетических заболеваний
  • генотипирование, создание генотипического паспорта
  • анализ ГМО продуктов и качества продуктов питания
  • определение личности
  • установление отцовства

На какие инфекции проверяет мазок на ПЦР

  • ПЦР чувствительна к любым известным микроорганизмам.
  • То есть способна выделить ДНК любого возбудителя: бактерии, вирусы, простейшие, грибы.ПЦР анализ в гинекологии: показания, правила подготовки, забора материала и проведения
  • Список возбудителей, которые выявляются методом ПЦР, совпадает со списком инфекционных агентов, способных вызывать ИППП.
  • сифилис
  • трихомониаз
  • хламидиоз
  • микоплазма и уреаплазма
  • гонорея
  • ВПЧ
  • мягкий шанкр
  • гарднереллез
  • генитальный или иной герпес
  • донованоз
  • цитомегаловирусная инфекция
  • ВИЧ
  • вирусные гепатиты
  • контагиозный моллюск
  • саркома Капоши
  • кандидоз
  • фтириаз
  • чесотка

Когда назначается ПЦР

Имеет значение срок забора материала. Анализ будет информативен уже в продромальном периоде заболевания. В разгар инфекционного процесса результат достигается практически с гарантированной точностью.

Для определения эффективности лечения ПЦР назначают не ранее чем через 30-60 дней по завершении курса антибиотиков.

Технология забора мазка на ПЦР

Для женщин необходима некоторая подготовка к забору мазка, в том числе на ПЦР.

Подготовка к забору мазков:

  • в день забора материала не мыться, не спринцеваться
  • не мочиться минимум за 2 часа до забора
  • мазки не собирают в период менструации и в течение 2 дней после нее
  • накануне не применять антисептические и антибактериальные средства, в том числе местно (свечи, орошение, таблетки, инъекции)
  • антибиотики должны быть приняты курсом, но первое исследование назначают через месяц после последнего приема

Рассмотрим, как именно берут мазок на Пцр у женщин.  Процедура выполняется врачом-гинекологом, урологом, венерологом или акушеркой при помощи стерильного тампона.

Им проводят по местам забора материала, по кругу, без нажатия:

  • ​мочеиспускательный канал
  • цервикальный канал
  • стенка влагалища
  • ​ампула прямой кишки
  • слизистая глаза и нижнее веко
  • задняя стенка глотки и миндалины

Тампон помещается в стерильную пробирку или им проводится по предметному стеклу с фиксатором. После чего материал доставляется в лабораторию.

Соскоб проводится тем же стерильным тампоном. Только вращательными движениями и с приложением некоторого усилия или специальной «щеткой».

Далее щетка или тампон также помещается в стерильную пробирку или ими проводится по предметному стеклу.

Забор мочи на ПЦР осуществляется стерильный контейнер, первые 50 мл, не выделяя средней порции. Далее контейнер закрывается и доставляется в лабораторию.

Забор мокроты на ПЦР проводится в стерильный контейнер. Предварительно пациенту предлагают выпить побольше жидкости.

С утра пациенту предлагают откашляться и отделить мокроту в стерильную посуду. Данное исследование используют для диагностики туберкулеза, хламидиоза и микоплазмоза.

Как берут кровь на ПЦР

Для сдачи крови в процедурную надо явиться натощак, накануне допустим только легкий ужин. При анализе методом ПЦР используется кровь из вены, для чего специальной иглой на вакутейнере производят прокол.

После присоединяют стерильную пробирку с пробкой к другому концу иглы. Под действием градиента давления (вакутейнер создает вакуум между иглой и пробиркой) кровь легко поступает в пробирку.

ПЦР крови на ВИЧ и гепатиты выполняется в реальном времени с определением концентрации ДНК (РНК) в плазме. Это исследование требуется для решения о назначении противовирусной терапии и прогноза степени риска передачи вируса от беременной к плоду.

Какой материал брать на исследование, решает врач исходя из клинической ситуации. Обычно мазки и моча используются для проведения ПЦР при определении возбудителей ЗППП.

  1. Кровь на ПЦР забирается при постановке диагноза герпеса, цитомегаловируса, ВИЧ и гепатитов, а также токсоплазмоза.
  2. Мазок на ПЦР из зева или, проще говоря, изо рта – при диагностике мононуклеоза и ЗППП: цитомегаловирус, ВПЧ, сифилис.ПЦР анализ в гинекологии: показания, правила подготовки, забора материала и проведения
  3. Мазок из ануса на ПЦР применяется при определении подавляющего большинства ЗППП.
  4. Какие именно возбудители будут разыскиваться при помощи ПЦР – определяет врач- венеролог после осмотра.

Хранение и транспортировка ПЦР анализов

Стерильные емкости и предметные стекла категорически нельзя замораживать. Хранить в помещении не более двух часов, и только в крайних случаях – в холодильнике еще 20 часов.
ПЦР анализ в гинекологии: показания, правила подготовки, забора материала и проведения
Необходимость обеспечивать температурный режим транспортировке в специальную генетическую лабораторию обуславливает использование термоконтейнеров. В них поддерживается температура от 4 до 8 градусов Цельсия.Поэтому очевидным плюсом медицинской организации является собственная лаборатория, способная выполнить полимеразную цепную реакцию.

Аналитический этап ПЦР диагностики

В лаборатории сперва выделяется ДНК из предоставленного образца.

Далее материал помещается в термостат в микроцентрифужных пробирках с добавлением амплификационной смеси на несколько часов.
ПЦР анализ в гинекологии: показания, правила подготовки, забора материала и проведения
Для сравнения выполняется контроль с известными ДНК определенных микроорганизмов. Выполняется электрофорез со смесью бромистого этидия и ДНК, что вызывает свечение в ультрафиолетовых лучах.

Электрофорез позволяет разделить продукты амплификации. При положительном результате теста они дают оранжевое свечение в коротком участке светового спектра.

Интерпретация результатов ПЦР анализа

  • При определении наличия ДНК (РНК) полимеразная цепная реакция считается положительной, и это точно демонстрирует наличие возбудителя.
  • Для диагностики вируса иммунодефицита человека и гепатитов В и С используют ПЦР с определением концентрации ДНК (РНК).
  • Для ДНК высокой считается концентрация 1,0 x 105 копи на такие инфекции как герпес, цитомегаловирус, ВИЧ и гепатиты, а также токсоплазмоз.

Количественная оценка ПЦР или количественный анализ экспрессии генов говорит об их активности. В результате экспрессии генов образуются определенные белки.

которые и считаются в рамках количественной ПЦР в реальном времени. По результату этого исследования врач судит об инфекционной нагрузке и активности возбудителей.

Читайте также:  Естественные роды или кесарево? о плюсах и минусах этих методов и возможных осложнениях

При диагностике ИППП используют несколько диагностических исследований. ПЦР позволяет довольно точно определить наличие определённого возбудителя уже в продромальный период развития инфекции.

Когда симптомы больше напоминают простуду, чем конкретное заболевание. Интересно также оценить напряженность иммунного ответа макроорганизма. Для этого назначаются серологические исследования ИФА, РПГА, РИФ и прочие.

Серология показывает, сколько антител и к какому именно антигену сформировалось, какая стадия заболевания наблюдается. Существует понятие «титр антител».

То есть их количество, характеризующее напряженность, то есть выраженность иммунитета.ПЦР анализ в гинекологии: показания, правила подготовки, забора материала и проведения Случается, что ответы разных исследований противоречат друг другу.

ПЦР является реакцией проверки, то есть именно по её положительному результату судят о наличии возбудителя. Например, если ПЦР положительна, а мазок на флору отрицательный.

Мы считаем, что в последнем случае в материал просто не попало нужного количества микроорганизмов. Или они не окрасились по разным причинам. Если ПЦР положительна, а серологические пробы отрицательны, то организм человека не вырабатывает иммунного ответа на возбудителя.

Наблюдается состояние иммуносупрессии, что бывает:

  • при ВИЧ
  • при приёме специальных лекарственных препаратов после трансплантации
  • при лечении аутоиммунных заболеваний
  • в период выздоровления после тяжёлой болезни
  • при истощении или тяжелой хронической усталости

Если ПЦР отрицательна, а серологические пробы положительны, то нужно смотреть на фракцию иммуноглобулинов. IgM характерен для острой фазы течения заболевания при первичном заражении.

В такой ситуации врач может повторить забор материала. Или ориентироваться по точному, но длительно выполняемому культуральному методу (посев культуры возбудителя на питательные среды).

Высокий титр Ig A или IgG могут свидетельствовать о хронической инфекции в стадии обострения. А их низкие титры – просто о том, что пациент перенёс данное заболевание. Именно поэтому серологические пробы не используют для контроля эффективности лечения. В частности, проводить ПЦР нужно после определенного промежутка.

Цена анализа зависит от материала, использованного для ПЦР, и колеблется от 350 до 1200 рублей.

При необходимости сдать ПЦР анализы обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

Источник: https://onvenerolog.ru/zppp/pcr-u-zhenshhin.html

Гинекологический мазок в ПЦР-методике

Взятие гинекологического мазка с последующим исследованием его с помощью ПЦР открывает возможности для диагностики инфекций, передаваемых половых путём. Открыто данное исследование было в 80-х годах 20 века.

Ученый, разработавший его, получил Нобелевское вознаграждение. Открытие позволяет узнавать возбудителя заболеваний при его минимальной концентрации в половых путях.

Высокая точность инновационной ПЦР-диагностики делает её незаменимым исследованием во многих сложных клинических случаях.

Методика исследования

Суть метода полимеразной цепной реакции заключается в размножении участка ДНК. Порой для возникновения симптомов определённых заболеваний необходима мизерная концентрация бактерий или вирусов.

Большинство микробиологических исследований не могут обнаружить патогенные организмы в таком разведении, а тем более их с точностью подсчитать.

В таких случаях только и выручает метод активного полимеразного наращивания.

ПЦР-диагностика требует для исследования участок ДНК, который подвергается клонированию.

К биологическому материалу добавляют различные реагенты, которые комплиментарно достраиваются к участкам выделенного генетического материала.

Многократное преумножение ДНК позволяет определить не только род, но и вид бактериологического или вирусного материала. Уточнение вида возбудителя делает лечение максимально эффективным и этиотропным.

ПЦР анализ в гинекологии: показания, правила подготовки, забора материала и проведения

Мазки ПЦР в гинекологии позволяют выделить возбудителей хламидиоза, гонореи, микоплазмоза, уреаплазмоза и многих других опасных инфекций. Часто эти заболевания долго существуют в скрытых, латентных формах и долго не проявляются клиническими симптомами. ПЦР позволяет выявить их на ранних стадиях и наиболее своевременно начать лечение.

Среди явных преимуществ полимеразной реакции выделены:

  1. Высокая точность определения природы патогенного микроорганизма.
  2. Возможность выделения вируса или бактерии при мизерных их концентрациях в биологическом материале.
  3. Анализы проводятся достаточно быстро.
  4. Заражение некоторыми микроорганизмами можно выявить только с помощью ПЦР. Вирус иммунодефицита также возможно выделить иди подтвердить с помощью данного диагностического мероприятия.

Исследование в гинекологии

В гинекологической практике мазок на ПЦР используется довольно широко. Ведь он позволяет выявить возбудителей большинства воспалительных заболеваний женских половых органов наружной и внутренней локализации. Анализ проводят женщинам, активно живущим половой жизнью, беременным пациенткам и проходящим прегравидарную подготовку.

  • Мазок ПЦР на ИППП нередко выявляет не только опасные бактериальные инфекции, но и заражение вирусами герпеса или папилломы человека. Последние и вовсе являются онкогенными провокаторами, излюбленным местом которых является ткань шейки матки.
  • ПЦР помогает выявить хламидии у беременных женщин, которые не обследовались на данную инфекцию до зачатия. Бактерия может вызывать различные уродства и пороки развития плода, а также вовсе прекращать его развитие. Носительство хламидий может долгое время не проявляться, быть выявлено лишь во время беременности как причина внутриутробной гибели зародыша. Но и при своевременном обнаружении бактерий у женщин «в положении» предоставляется возможным провести лечение без урона для матери и плода.

Является ошибочным мнение, что взятие мазков ПЦР на ИППП при беременности создает угрозу выкидыша.

Соскоб для исследования действительно берут из шейки матки, но таким образом, что не затрагивают растущий эмбрион.

К тому же, данная анатомическая область по длине составляет около 4 см вне беременности и несколько уменьшается на поздних сроках гестации. Это позволяет достаточно безопасно взять материал для исследования.

ПЦР анализ в гинекологии: показания, правила подготовки, забора материала и проведения

Увеличивают достоверность анализа некоторые простые правила, которые следует соблюдать женщинам перед исследованием:

  1. Пациенткам рекомендуется не мочиться 2-3 часа до выполнения соскоба из шейки матки.
  2. За день до взятия материала необходимо отменить прием антибактериальных и бактериостатических средств.
  3. Вне беременности лучше сдавать мазок в середине менструального цикла. Неблагоприятным периодом считается время до начала менструального кровотечения или сразу после него.
  4. 2-3 дня не рекомендуется использовать локальные средства контрацепции или любые другие вагинальные медикаменты.
  5. Сутки до исследования нельзя иметь половые отношения.
  6. Накануне взятия пробы запрещается принимать душ и обмывать наружные половые органы.
  7. Нельзя брать соскоб из шейки матки в тот же день, когда проводилось кольпоскопическое исследование.

Довольно простые рекомендации позволят наиболее точно определить заболевание, передающееся половым путем, по генетическому материалу его возбудителя.

Показания для ПЦР

Полимеразная реакция как метод диагностики представляет собой новый и инновационный способ идентификации микроорганизмов. К его помощи активно прибегают в следующих случаях:

  1. При установлении причин бесплодия. Невозможность зачать ребенка часто связана с инфекцией половых органов, которую тяжело распознать обычными способами. Латентное течение многих инфекций определяет склонность к прерыванию беременности, несостоятельности имплантации плодного яйца.
  2. При установленной природе инфекционного возбудителя ПЦР проводится для выяснения фазы заболевания: острой или хронической.
  3. Мазки ПЦР у женщин берут в случае тяжело протекающих беременностей. Внутриутробные инфекции, приобретенные до беременности и в ее активное течение, вызывают задержку развития и гибель плода. Рождение детей с аномалиями развития заставляет обследовать мать повторно в послеродовом периоде.
  4. В ходе диагностической процедуры возможно установить также чувствительность и устойчивость микроорганизмов к антибиотикам.

Несмотря на кажущуюся сложность, проведение полимеразной реакции продолжатся не более 4 дней. Это время необходимо для построения полноценной молекулы ДНК, которую удается идентифицировать с конкретным микроорганизмом. Взятие биологического материала как субстрата для анализа и вовсе занимает до 5 минут.

Результат ПЦР-метода имеет два варианта интерпретации: позитивный либо негативный:

  • Положительный ответ полимеразной реакции подтверждает наличие в материале микробных следов, а также указывает род и вид возбудителя.
  • Отрицательный результат говорит о стерильности биологического материала, отсутствии бактерий и вирусных частиц.

На основе расшифровки мазка врач определяется с методикой лечения.

Этиотропные антибиотикотерапия или противовирусное лечение позволяют быстро и бесследно очистить микрофлору от возбудителя опасных инфекций.

Своевременная диагностика не позволяет навредить и растущему плоду во время беременности матери – при проведении терапевтических курсов эрадикации возбудителей инфекций, передающихся половым путем.

Источник: http://ZdorovieLedy.ru/diagnostika/mazok-pcr-v-ginekologii.html

Правила забора материала для исследования методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени

Отделяемое конъюнктивы

  1. Материал забирается утром до умывания с внутренней поверхности нижнего века движением от наружного к внутреннему углу глазной щели.
  2. Необходимо следить, чтобы при моргании ресницы не касались тампона (придерживать веки руками).
  3. При скудном отделяемом тампон предварительно смачивают стерильным физиологическим раствором или стерильной дистиллированной водой. Избыток влаги отжимают о внутреннюю поверхность ёмкости.

Особенности взятия мазков из носоглотки

  1. Для взятия материала предпочтительно использовать транспортную среду и тампон на алюминиевом аппликаторе, т.к. его можно изогнуть под углом 1200, что необходимо для достижения области носоглотки. Вскрыть упаковку с тампоном со стороны держателя, аппликатор изогнуть, не вынимая его из стерильной упаковки. Руками к аппликатору не прикасаться, брать только за держатель.
  2. Пациента усадить на стул против источника света. Зонд с ватным тампоном ввести лёгким движением по наружной стенке носа на глубину 2-3 см до нижней раковины. Затем зонд слегка опустить книзу, ввести в нижний носовой ход под нижнюю носовую раковину, сделать вращательное движение и удалить вдоль наружной стенки носа.
  3. После забора материала тампон поместить в стерильную одноразовую пробирку с 500 мкл транспортной среды. Конец зонда отломить или отрезать, с расчётом, чтобы он позволил плотно закрыть крышку пробирки. Пробирку с раствором и рабочей частью зонда закрыть и промаркировать.
  4. Допускается хранение материала до проведения исследования в течение суток при температуре 2-80С. Допускается однократное замораживание — оттаивание материала.
Читайте также:  Вагинальный кандидоз: причины, симптомы, как лечить острую и хроническую форму

Особенности взятия мазков из ротоглотки

  1. Для взятия материала предпочтительно использовать транспортную среду и тампоном на алюминиевом аппликаторе, т.к. его можно изогнуть под углом 1200, что необходимо для достижения области ротоглотки. Вскрыть упаковку с тампоном со стороны держателя, аппликатор изогнуть, не вынимая его из стерильной упаковки. Руками к аппликатору не прикасаться, брать только за держатель. Пациента усадить на стул против источника света.
  2. Мазки из ротоглотки берут сухим зондом вращательными движениями с поверхности миндалин, нёбных дужек и задней стенки ротоглотки после предварительного полоскания полости рта водой.
  3. После забора материала тампон поместить в стерильную одноразовую пробирку с 500 мкл транспортной среды. Конец зонда отломить или отрезать, с расчётом, чтобы он позволил плотно закрыть крышку пробирки. Пробирку с раствором и рабочей частью зонда закрыть и промаркировать.
  4. ВНИМАНИЕ! Рекомендуется совмещать мазки из носоглотки и ротоглотки в одной пробирке. Для этого рабочие концы зондов после взятия мазков у пациента помещаются в одну пробирку с 500 мкл транспортной среды и исследуются как один образец.
  5. Допускается хранение материала до проведения исследования в течение суток при температуре 2-80С. Допускается однократное замораживание — оттаивание материала.

Особенности взятия мокроты

  1. Исследованию подлежит утренняя мокрота, выделяющаяся во время приступа кашля.
  2. Перед откашливанием необходимо почистить зубы и прополоскать рот кипяченой водой с целью механического удаления остатков пищи, слущенного эпителия и микрофлоры ротовой полости. Следите за тем, чтобы в контейнер не попала слюна и носоглоточная слизь (особенно при насморке!).
  3. Выделившуюся мокроту собирают в стерильный контейнер с красной крышкой. Крышку плотно закрывают, чтобы материал не вытек и маркируют. Если мокрота отделяется плохо, накануне пациенту дают отхаркивающие средства.
  4. Допускается хранение материала до проведения исследования в течение суток при температуре 2-80С.

Особенности взятия материала из уретры

  1. Перед взятием материала пациенту рекомендуется воздержаться от мочеиспускания в течение 1,5-2 часов.
  2. Непосредственно перед взятием материала наружное отверстие уретры необходимо обработать тампоном, смоченным стерильным физиологическим раствором. При наличии гнойных выделений соскоб рекомендуется брать через 15-20 мин после мочеиспускания, при отсутствии выделений необходимо провести массаж уретры с помощью зонда для взятия материала.
  3. У женщин перед введением зонда в уретру проводится ее массаж о лобковое сочленение. В уретру у женщин зонд вводится на глубину 1,0-1,5 см, у мужчин – на 3-4 см и затем делается несколько вращательных движений, у детей материал для исследования берут только с наружного отверстия уретры.
  4. После взятия материала зонд опускается в пробирку с транспортной средой и несколько раз вращается, а затем удаляется из пробирки. Пробирка плотно закрывается и маркируется.
  5. Если время транспортировки биологического материала с момента взятия до момента его доставки в лабораторию более 2-х часов, то пробирку необходимо хранить при +40С. Транспортировка биологического материала должна производиться только в сумке-холодильнике. В замороженном виде биологический материал может храниться не более 2-х недель.

Особенности взятия мазка из влагалища

  1. Материал должен быть взят до проведения мануального исследования. Зеркало перед манипуляцией можно смочить горячей водой, применение антисептиков для обработки зеркала противопоказано.
  2. Влагалищное отделяемое собирают стерильным одноразовым зондом из заднего нижнего свода или с патологически измененных участков слизистой и помещают в пробирку с транспортной средой. У девочек взятие материала производят со слизистой оболочки преддверия влагалища, а в отдельных случаях – из заднего свода влагалища через гименальные кольца. После внесения зонда в транспортную среду он несколько раз вращается, а затем удаляется из пробирки. Пробирка закрывается и маркируется.
  3. Если время транспортировки биологического материала с момента взятия до момента его доставки в лабораторию более 2-х часов, то пробирку необходимо хранить при +40С. Транспортировка биологического материала должна производиться только в сумке-холодильнике. В замороженном виде биологический материал может храниться не более 2-х недель.

Особенности взятия материала из цервикального канала

  1. Перед взятием материала необходимо удалить ватным тампоном слизь и затем обработать шейку матки стерильным физиологическим раствором. Зонд вводится в цервикальный канал на глубину 0,5-1,5 см.
  2. При наличии эрозий цервикального канала необходимо их обработать стерильным физиологическим раствором, и материал следует брать на границе здоровой и измененной ткани. При извлечении зонда необходимо полностью исключить его касание со стенками влагалища.
  3. После взятия материала зонд опускается в пробирку с транспортной средой. После внесения зонда в транспортную среду он несколько раз вращается, а затем удаляется из пробирки. Пробирка закрывается и маркируется.
  4. Если время транспортировки биологического материала с момента взятия до момента его доставки в лабораторию более 2-х часов, то пробирку необходимо хранить при +40С. Транспортировка биологического материала должна производиться только в сумке-холодильнике. В замороженном виде биологический материал может храниться не более 2-х недель.

Особенности взятия секрета предстательной железы

  1. Перед взятием секрета простаты головка полового члена обрабатывается стерильным ватным тампоном, смоченным физиологическим раствором.
  2. Секрет простаты берется после предварительного массажа простаты через прямую кишку. Врач проводит массаж с надавливанием несколькими энергичными движениями от основания к верхушке. Затем из кавернозной части выдавливается простатический секрет.
  3. Образец помещается в одноразовую сухую пластиковую пробирку с плотно закрывающейся или завинчивающейся крышкой и передается в лабораторию.
  4. Транспортировка биологического материала должна производиться только в сумке-холодильнике.

Правила сбора мочи для мужчин

  1. Вымойте руки с мылом.
  2. Отведите назад крайнюю плоть (если она не обрезана), головку полового члена вымойте с мылом теплой кипяченой водой, просушите с помощью чистой салфетки.
  3. Подготовьте контейнер, приоткрыв крышку контейнера так, чтобы ее можно было снять одной рукой. Не дотрагивайтесь руками до внутренних стенок контейнера и крышки.
  4. Выпустите небольшое количество мочи в унитаз. Приостановите мочеиспускание.
  5. Удерживая крайнюю плоть в отведенном положении, направьте струю мочи в контейнер и наполните его до половины объема, при этом старайтесь не касаться краев контейнера.
  6. Тщательно закройте контейнер крышкой и промаркируйте.

Правила сбора мочи для женщин

  1. Проведите туалет наружных половых органов.
  2. Снимите крышку с контейнера и возьмите его в руку, стараясь не касаться краев. Соберите мочу (примерно треть объема контейнера). Постарайтесь не прикасаться контейнером к телу.
  3. Во избежание попадания в мочу выделений из влагалища, во время сбора мочи женщинам, живущим половой жизнью, рекомендуется ввести во влагалище тампон.

Правила сбора спермы

  1. Перед сбором материала тщательно вымойте руки с мылом, а затем проведите туалет наружных половых органов. Головку полового члена и крайнюю плоть высушите стерильной салфеткой.
  2. Подготовьте контейнер, крышку контейнера приоткройте так, чтобы ее можно было снять одной рукой. Не дотрагивайтесь руками до внутренних стенок контейнера и крышки.
  3. Материал собирают в стерильный контейнер. Обратите внимание на то, чтобы крышка на контейнере была хорошо закрыта во избежание вытекания материала.
  4. Условия хранения материала: при комнатной температуре — 6 часов, при температуре 2-80С — в течении 1 суток.

Правила сбора кала

  1. Материал (кал) на выявление микроорганизма собирается до начала лечения антибактериальными и химиотерапевтическими препаратами.
  2. Для исследования собирают свежевыделенный кал.
  3. За 3-4 дня до исследования отменить прием слабительных препаратов, касторового и вазелинового масла и прекратить введение ректальных свечей.
  4. Кал, полученный после клизмы, а также после приема бария (при рентгеновском обследовании) для исследования непригоден.
  5. Кал собирается в чистый, одноразовый контейнер с завинчивающейся крышкой и ложечкой в количестве не более половины объема ложечки (вишневая косточка).
  6. Материал доставляется в лабораторию в течение 3 часов с момента сбора анализа. Желательно в течение указанного времени материал хранить в холоде (+40С).

Условия, соблюдение которых обязательно:

  • не допускается замораживание;
  • не допускается длительное хранение (более 5-6 часов);
  • не пригодны никакие транспортные контейнеры, кроме указанных;
  • не допускается хранение в неплотно закрытом контейнере;

Правила сбора грудного молока

  1. Перед сцеживанием молока тщательно помойте руки и молочные железы с мылом, обработайте соски и околососковую область ватными тампонами, смоченными 70% спиртом (каждая железа обрабатывается отдельным тампоном).
  2. Сцедите первые 5-10 мл в отдельную посуду (т.к. эта порция молока не пригодна для исследования), последующие 4-5 мл сцедите в стерильный контейнер, старайтесь при этом не касаться краев контейнера телом.
  3. Молоко из каждой железы собирайте в отдельный контейнер, крышку необходимо плотно закрыть.

Правила взятия крови

  1. Взятие крови следует проводить натощак или через 3 часа после приема пищи из локтевой вены одноразовой иглой в специальную выкуумную систему типа «Vacuett®».
  2. После взятия крови пробирку следует плавно несколько раз перевернуть вверх дном, чтобы кровь в пробирке тщательно перемешалась с антикоагулянтом (в противном случае, кровь свернется, и выделение ДНКРНК станет невозможным!).
  3. Пробирку промаркировать.

Источник: http://www.infections.ru/about-iac/structure/pcr/rules-getting-materials.html

Ссылка на основную публикацию